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　　液相色谱柱的应用 : Al2O3 、聚合物基质、硅胶基质一、 Al 2O 3基质优点: PH 稳定性好 1-14 缺点:化学修饰难 、聚合物基质优点: 1. PH 稳定性好 1-13 2. 可进行表面化学处理以满足反相色谱、离子交换色谱、疏水作用色谱和体积排阻色谱的需求. 3. 在中等 pH 条件下对强碱性物质具有更好的峰形。缺点: ,孔径不均匀,导致柱效不够高 。优点: 1. 目前应用最广泛的基质材料 pH 条件下对强碱性物质具有更好的峰形。 4. 高效、重现性好 、反相、离子交换、疏水作用色谱和体积排阻色谱的需求。三、硅胶基质缺点: PH 范围是 3-8 ,在高或低的 pH 下都容易溶解。 )硅胶纯度定义:填料硅胶的纯度与残留金属的离子浓度。硅胶纯度对强极性化合的分离最重要。 A型硅胶(纯度较低):金属硅酸盐制备而来,具有很高的金属含量,可用作中性化合物和非离子化合物的分离。由于带负电荷的残留硅羟基和酸性表面上金属含量高, (硅羟基的 PKa 低),导致碱性化合物发生拖尾。 B型硅胶:纯度高、酸性较弱的硅胶。这种硅胶是以无金属的工艺制备而来,只含有微量的金属可用于分离离子化合物和可电离的化合物,特别是碱性化和物。 )色谱柱的尺寸柱的长度和内径短柱( 15-100mm) 运行时间短,柱压低长柱( 150-250mm) 分辨率高,运行时间长窄径柱(≤ )检测器灵敏度高宽径柱( 3-) 载样量高 )颗粒形状球型或无定型当使用黏度较大的流动相时,球型颗粒可降低柱压,延长色谱柱寿命。 ,柱床结构均匀,柱效高,重现性好; ,柱床结构不均匀,流动相线性速度不均匀,谱带扩宽。 5 μm目前应用最广泛,可以满足从分析到半制备的分离 3 – μm常用于分析柱上的快速分离,色谱柱短,节省溶剂 2 μm常应用于超快速分离, high throughput, 分离度高 7 – 10 μm常用于半制备色谱柱 10 – 20 μm常用于制备色谱柱 )粒径粒径是指柱填料的颗粒直径的大小。实际上色谱柱上所标的粒径是一个平均值通常 3-10 μm 平均粒径越小,颗粒分布度越小,色谱柱效越高,反压亦越高。 )表面积定义:颗粒外表面与内部孔面积的总和,以 m 2 2 /g表示?高表面积对于多组分样品的分离具有较强的保留能力、柱容量和分离度。?表面积低的填料通常能迅速达到平衡,对于梯度洗脱尤为重要。 )孔径定义:是指填料颗粒的孔或腔的平均尺寸,范围 80-300 ? 大孔的填料颗粒,可以延长溶质大分子在填料表面滞留的时间, 达到充分分离,改善峰形。?较小的孔径提供较高的表面积,可用于较大的载荷量, 并保留小的有机化合物,这种填充柱可用于小分子有机物到聚合物的分离?样品 MW4000, 选择 80 ?的孔径;样品4000, 选择 300 ?的孔径